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模块5 生物技术与工程 141

                                        题型强化四 基因工程的综合应用

                                                                                  建议用时: 30分钟   答案见 D46
            1. 科学家运用基因工程技术将结核分枝杆菌                                    EcoRⅠ 酶识别序列并标出切点:

            MPT64基因( 能控制合成 MPT64蛋白) 成功导                               ( 用“ ↓ ” 表示切点位置)。乙图中EcoRⅠ酶
             入胡萝卜细胞, 最终表达出肺结核疫苗。回答下                                   所识别的位点应在 Ti 质粒的    片段

             列问题:                                                     上。都用EcoRⅠ酶获取目的基因和切割 Ti
             ( 1 ) 基因工程的核心步骤是        , 所                              质粒的一个最大的缺点是                                。


                 用到的工具酶有                                    。    ( 2 ) 将基因的表达载体导入马铃薯的分生组织


             ( 2 ) 通常采用PCR 技术扩增 MPT64基因, 前提                           细胞中最常用的方法是     , 选择马铃
                                                                      薯的分生组织细胞作目的基因的受体细胞
                 是要             , 以便根据
                                                                      的原因是                                       。
                 这一序列合成引物。在操作步骤中冷却至
                                                                 ( 3 )用抗除草剂基因和固氮基因作探针, 通过


                50℃左右的目的是
                                                                      DNA 杂交技术检测固氮基因高度表达的转
                            。
                                                                      基因马铃薯植株的体细胞, 发现固氮基因存
             ( 3 )根据农杆菌的特点, 如果将 MPT64基因插

                                                                      在, 却没发现抗除草剂基因存在, 请分析原
                 入       上, 通过农杆菌的转化作
                                                                      因                 。
                 用, 可以使目的基因进入胡萝卜细胞, 并将
                                                                 ( 4 ) 转固氮基因马铃薯即使不施氮肥也能茁壮
                 其插入植物细胞中的        上。要
                                                                      成长, 减少了农业生产成本的投入, 还可以
                 确认 MPT64基因是否插入胡萝卜植株中,
                                                                      减轻水体的        。
                 可用      技术。
                                                                 3. 人体内 BAFF 蛋白过量, 与 B 细胞表面的

            2. [ 陕西绥德中学高二月考]“ 中国人要把饭碗                                                                                                                                                                                                                
                                                                 TACⅠ蛋白结合, 会导致 B 淋巴细胞过度增殖、
             端在自己手里, 而且要装自己的粮食”“ 马铃薯主                            分化而引起自身免疫病; 外源性的 TACⅠ 蛋白
             粮食化” 是国家战略。为了实现栽培马铃薯不需                              能与 BAFF 结合治疗 BAFF 过量引起的自身免

             施氮肥、 不需洒农药, 就要培育固氮马铃薯、 抗病                           疫病。请回答下列问题:
             虫马铃薯, 下图是培育固氮马铃薯过程中的建构                              ( 1 ) 人体内 TACⅠ蛋白的合成过程称作

             基因表达载体的示意图, 请回答下列问题。                                          。通过蛋白质工程合成 TACⅠ蛋

                                                                      白, 其基本途径是从 TACⅠ蛋白功能出发,
                                                                      通过                                       和
                                                                                 , 进而确定相对应的

                                                                               , 据此获得 TACⅠ基因,

                                                                      再经表达、 纯化获得 TACⅠ蛋白。因此, 蛋
                                                                      白质工程的目标是

                                                                                                                 。
                                                                 ( 2 ) 获得TACⅠ基因后, 可利用大肠杆菌生产大

                                                                      量 TACⅠ蛋白, 需用到的生物工程还有
             ( 1 ) 甲图所示的 DNA 片段含有根瘤菌拟核上固                                   和发酵工程。该过程中选用大肠

                 氮酶活性极强的固氮基因, 乙图所示质粒含                                 杆菌的优点是

                 有 T DNA 序列和抗除草剂基因, 请写出                               ( 答出两点即可)。
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