Page 64 - 高考生物小题狂做·基础篇·新课标（新教材老高考版）

小帮手———知识精华

( 1 ) 基因表达载体除了含有图甲所示的条件外, 还应该含有 、 。
( 2 ) SalⅠ切割目的基因形成的黏性末端是 。构建 Com8重组质粒时, 需用
p
( 限制酶) 对图示质粒进行处理, 才能与 P450基因在 的作用下
形成重组质粒。

( 3 ) 经测定原质粒为7.6kb ( 1kb为1000个碱基对), 重组质粒经 NdeⅠ 、 Ss p Ⅰ联合酶

切后获得了6.0kb和1.2kb的两个片段, 则目的基因的长度为 kb 。
( 4 ) 为了扩增重组质粒, 需将其转入用 预先处理的土著菌种 Y9中, 提高质
粒导入率, 以便获得更多基因工程菌 P450 / Y9 。为了筛选出转入了重组质粒的基因工程菌

P450 / Y9 , 应在筛选平板培养基中添加 , 选择颜色为 的菌落扩大

培养, 进而筛选出所需的工程菌。
( 5 ) 为检测基因工程菌降解石油的能力, 科研人员做了如下4组实验, 测定不同时间各组

的石油降解率, 实验结果见图丙。据图分析以下说法正确的有 。
A. 单独使用 P450 / Y9对石油的降解能力比单独使用 Y9略强

B. 作用时间越长, P450 / Y9对石油降解的能力越强
C. 联合使用时, P450 / Y9能显著增加四种菌的整体降解石油的能力

D. 为达到更好的效果, 最好单独使用基因工程菌 P450 / Y9

答案 ( 1 )目的基因 复制原点、 启动子、 终止子 ( 2 )— AGCT Nde Ⅰ 、 Xho Ⅰ
2+
)
DNA 连接酶 ( 3 ) 1.4 ( 4 ) Ca ( 或 CaCl 2 庆大霉素 白色 ( 5 ) AC
解析 ( 2 ) Sal Ⅰ 的酶切位点为— G TCGAC —, 切割目的基因形成的黏性末端是—
↓
AGCT 。用SalⅠ和 Nde Ⅰ联合酶切获得的 P450基因, 因此构建 Com8重组质粒时, 需用
p
NdeⅠ 、 XhoⅠ ( XhoⅠ和 SalⅠ切割后有相同的黏性末端) 对图示质粒进行处理, 才能与P450
基因在 DNA 连接酶的作用下形成重组质粒。( 3 ) 经测定原质粒为7.6kb ( 1kb为1000个碱

基对), 重组质粒经 NdeⅠ 、 Ss p Ⅰ联合酶切后获得了6.0kb和1.2kb的两个片段, 则目的基

因的长度为6.0+1.2- ( 7.6-1.8 ) =1.4kb 。( 4 )用 Ca 预先处理的土著菌种 Y9中, 使其处
2+
于感受态, 提高质粒导入率, 以便获得更多基因工程菌P450 / Y9 。重组质粒上有庆大霉素抗性基

因aacCl , 为了筛选出转入了重组质粒的基因工程菌 P450 / Y9 , 应在筛选平板培养基中添加庆

大霉素, 选择颜色为白色的菌落扩大培养, 进而筛选出所需的工程菌。( 5 )比较 B 组和 C 组,
可知单独使用 P450 / Y9 对石油的降解能力比单独使用 Y9 略强, A 正确; 作用时间越长,
P450 / Y9 对石油降解的能力越弱( 斜率下降), B 错误; D 组降解效果优于 C 组, 因此联合使用

时, P450 / Y9能显著增加四种菌的整体降解石油的能力, C 正确; 为达到更好的效果, 最好联合

使用 D 组四种菌株, D 错误。

命题预测: 本专题知识是高考的重点。预计高考命题可能会联系其他生物技术, 以最近的基因工程的研究成果为
背景, 考查基因工程的原理、 技术和应用, 题型多为非选择题。

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